人MEK激酶酶联免疫检测
试剂盒使用说明书
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人MEK激酶，只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途： 用于人血清、血浆及相关液体样本中MEK激酶的测定。
工作原理
本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人MEK激酶的水平。向预先包被了人MEK激酶单克隆抗体的酶标孔中加入MEK激酶，温育；洗涤后，加入HRP标记过的MEK激酶抗体。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人MEK激酶的浓度呈正相关。
试剂盒组成
|
1 |
标准品（480pmol/L） |
0.5ml |
7 |
显色剂A液 |
3ml |
|
2 |
标准品稀释液 |
3ml |
8 |
显色剂B液 |
3ml |
|
3 |
酶标包被板 |
12孔×4条 |
9 |
终止液 |
3ml |
|
4 |
酶标试剂 |
3ml |
10 |
说明书 |
1份 |
|
5 |
20倍浓缩洗涤液 |
20ml |
11 |
封板膜 |
2张 |
|
6 |
样品稀释液 |
3ml |
12 |
密封袋 |
1个 |
需要而未提供的试剂和器材
1．
2． 标准规格酶标仪。
3． 精密移液器及一次性吸头
4． 蒸馏水，
5． 一次性试管
6． 吸水纸
注意事项
1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差
3． 建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
4． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于
操作程序
1． 标准品的稀释（本试剂盒提供原倍标准品一支，用户请按照说明在小试管中自行倍比稀释）：
|
240pmol/L |
（5号标准品） |
120μl的原倍标准品加入120μl的标准品稀释液 |
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120pmol/L |
（4号标准品） |
120μl的5号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
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60pmol/L |
（3号标准品） |
120μl的4号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
|
30pmol/L |
（2号标准品） |
120μl的3号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
|
15pmol/L |
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