土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理:
S-SC催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二**水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯1mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:液体7.5mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入22mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体22mL×1瓶,4℃保存。
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤和加样表:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.03 |
0.03 |
试剂一(μL) |
5 |
5 |
振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴15min
试剂二(μL) |
75 |
75 |
试剂三(μL) |
220 |
|
蒸馏水(μL) |
|
220 |
充分混匀,放入37℃水浴培养24小时,10000 g,4℃,离心5min,取上清液
上清液(μL) |
85 |
85 |
试剂四(μL) |
215 |
215 |
充分混匀,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,蒸馏水稀释10倍(可以吸取100μL,加入900μL蒸馏水稀释;若吸光度大于4,可以加大稀释倍数),取200uL至微量石英比色皿或96孔板中510nm处读吸光值A。计算ΔA=A测定管-A对照管
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