•  同义词：BHT-101

   

  背景：由一位63岁患有间变性乳头状甲状腺癌的妇女的淋巴结转移建立；文献中描述细胞不产生激素，但甲状腺球蛋白和甲状腺素（T4）部分阳性

   

  物种：人类（智人）

   

  组织：甲状腺

   

  疾病：甲状腺癌

   

   

  形态：单层生长的上皮样细胞；

   

  生长方式：不适用

   

  倍增时间：约2-3天

   

  DNA图谱：无

   

  培养基：DMEM+20%FBS

   

  我们强烈建议购买完整的培养基。

   

  冻存介质：90%FBS+10%DMSO

   

  支原体：DAPI阴性，微生物培养，RNA杂交试验

   

  免疫学：细胞角蛋白+，细胞角蛋白-7+，细胞角蛋白-8+，细胞角蛋白-17-，细胞角蛋白-18+，细胞角蛋白-19+，结蛋白-，内皮细胞-，EpCAM+，GFAP+，神经丝-，甲状腺球蛋白-，波形蛋白+

   

  指纹图谱：小卫星标记的多重PCR显示了一个独特的DNA图谱

   

  物种：经AST、G6PD、LDH、NP等IEF鉴定为人

   

  细胞遗传学：人类超四倍体核型

   

  病毒ELISA：逆转录酶阴性；PCR：EBV-、HBV-、HCV-、HHV-8-、HIV-1-、HIV-2-、HTLV-I/II-、MLV-、SMRV-

   

  细胞收到后处理：
  细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）
  细胞培养步骤：
  1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
  2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
  1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
  1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
  2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
  3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
  4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
  PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）