人P物质/SP检测/ELISA     Substance P (SP)Human 

实验原理

用纯化的抗原包被微孔板，制成固相载体，往包被抗原的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗原、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

自备物品

1. 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）

2. 微量加液器及吸头，EP管

3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸

标本的采集及保存

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃次日于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。