产品简介

3DCultr Prostate Cancer Organoid Growth Medium (Human)前列腺癌类器官生长培养基不含血清，可应用于细胞或组织来源的前列腺癌类器官的建立和长期培养，在细胞外基质存在的条件下，培养基所含特有组分及丰富的细胞因子能促使前列腺癌细胞迅速生长并形成前列腺癌类器官，同时保持较高的前列腺癌细胞特性和活力，为后续基于前列腺癌类器官的生理功能、疾病研究和精准医疗提供支持。

产品信息

组分信息 

储存条件

-25℃ ~ -15℃储存，有效期1年；2-8℃储存，有效期1月。

注意事项

1. 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅用于科研。

使用说明

1. 产品应用

无菌操作条件下配制前列腺癌类器官完全培养基。以下是准备100 mL完全培养基的操作流程，可根据所需总量调整相应用量。

1. 将营养组分1室温解冻或者2 - 8℃过夜缓融。避免反复冻融，现配现融。
2. 将基础培养基90 mL冰箱取出恢复至室温。
3. 将10 mL营养组分1加入到基础培养基内，均匀混合；如暂不使用，短时2 - 8℃储存。
4. 使用时可加入1%双抗使用。

1. 人源前列腺癌原代培养

1. 取材：标本离体后，尽快取材。采用无菌器械，保证无菌环境，将肿瘤组织放入含有5 mL的原代组织保存液的15 mL离心管中，4℃转运。
2. 清洗：在生物安全柜中取出样品管，去除组织保存液，加入适量冷的含有双抗的PBS，反复清洗后，去除PBS。
3. 重复清洗：重复第2步骤3次。
4. 组织处理：去除PBS缓冲液后，将组织块移至10 cm含10 mL冷原代组织保存液的无菌培养皿中，用无菌眼科显微剪将组织剪碎（直径约0.5 mm - 1 mm）。
5. 重复清洗：使用常温PBS，重复清洗3次。
6. 收集组织碎片，加入组织消化液消化20 - 30 min，过70 μm筛网，收集前列腺癌细胞。
7. 红细胞裂解：加入10 mL红细胞裂解缓冲液，室温下在翘板摇床上摇10 min。
8. 重复清洗：裂解完毕，使用常温DMEM/F12，重复第2步骤3次。
9. 类器官种板：调整细胞密度为2-3×10⁶，与基质胶1：1均匀混合，将细胞混悬液以40 - 60 μL每孔种在24孔板中，37℃放置15 - 30 min，加入预热的类器官培养液，每个孔750 μL。
10. 类器官培养：将培养板放在37℃，CO₂培养箱培养。每2天更换培养液。加入培养液时，吸头朝向侧壁，缓慢加入。
11. 类器官观察：每天观察类器官并拍照，了解初始类器官数量、增殖速度、形态、微生物污染情况等。