PicaGreen dsDNA 定量检测试剂盒
产品名称: PicaGreen dsDNA 定量检测试剂盒
英文名称: PicaGreen dsDNA Assay Kit *2000 assays*
产品编号: C6030
产品价格: 0
产品产地: 北京
品牌商标: Bioss
更新时间: null
使用范围: null
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1.应用说明
在分子生物学的试验过程中,PicoGreen dsDNA 定量试剂盒是荧光检测双链 DNA 并进行定量 的一种产品,这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术中的:cDNA 文库的构建;用于亚克隆的 DNA 片段纯化及应用,比如进行 DNA 定量、产物扩增和引物的进一步检测。 疫苗是现代疾病预防中常用的控制方式。如今许多疫苗是细胞培养疫苗,比如重组乙肝疫苗、狂犬病疫苗等大多数疫苗都采用细胞培养的方法生产。其中,疫苗的纯化是关键问题,我们需要尽可能的去除宿主细胞DNA和宿主蛋白。假若宿主细胞的DNA和蛋白同疫苗一起注入人体将会产生不可预料的后果。
常规的DNA含量的检测方法是在260nm(A260)处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大,并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰,无法区分DNA和RNA,而且这种方法不灵敏(5μg/mLdsDNA溶液A260=0.1)。
PicoGreen定量检测方法简单、方便,被多家生物制品厂所选择,成为生物制品残留DNA检测的标准。
目前该方法已纳入2010年版《中国药典》
原理:
PicoGreen与DNA双链结合后才发出的荧光,无DNA不发荧光;所发荧光与DNA浓度成正比。在2010年《中国药典》中提出,PicoGreen定量DNA的方法检出限约0.3ng/ml,DNA含量在1.25-80ng/mL范围时线性较好(R2>0.99).
优点:
1)该方法可以测定来源于任何表达宿主样品中的双链DNA。
2)可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
3)远远超出传统紫外A260的检测方法和Hoechst33258的灵敏度。
4)较高浓度的盐,尿素,乙醇,氯仿,去垢剂,蛋白或琼脂糖对测定无影 响。
5)在等摩尔浓度 ssDNA 和 RNA 存在的条件下测定 dsDNA,其影响很小。