超长基因定点突变试剂盒 
超长基因定点突变试剂盒
产品说明：
本试剂盒采用反向 PCR（Inverse PCR）技术，对含有目标基因的双链环状质粒进行扩增，直接 导入突变序列，从而实现单个或多个邻近碱基的突变（mutation）、缺失（deletion）、或插入（insertion）。 该技术的原理如图所示。首先以甲基化的质粒 DNA 为模板，使用人工合成含有目的突变碱基的引 物进行扩增反应，然后用 DpnI 限制性内切酶消化不含突变的质粒模板，再进行转化和筛选。
本试剂盒采用保真性能和扩增效率俱佳的 Mut XL Enzyme，能快速扩增 15 kb 以下的质粒 DNA（15-30 s/kb），最大限度地保持扩增质粒的保真性，大大缩短反应时间，是 Mut Site-directed Mutagenesis Kit（Cat：T1900）的升级产品。该方法操作简单快捷，突变阳性率高，严格按说明书 操作，6 个以下连续碱基的突变率可达 90%以上，最多可实现 21 个连续碱基的插入或删除。
对于非甲基化的质粒（例如从大肠杆菌 JM110 或 SCS110 菌株中提取的质粒），可通过转化 dam ＋ 的大肠杆菌菌株（如 DH5α、TOP10、JM109、XL1-Blue 等），再抽提获得甲基化的质粒作为 PCR 反应模板。
本试剂盒提供一个 4.5 kb、含有突变的 lacZ 基因的对照质粒（Control Plasmid）。质粒转化大 肠杆菌后在含 Amp、IPTG 和 X-gal 的琼脂平板上呈白色菌落；采用试剂盒提供的 Control Primers 成功进行突变反应后，菌落呈现蓝色，可据此检测突变效率。
说明书链接：http://www.solarbio.com/data/pdf/0_20200824vqdswb.pdf